RESUMO Avaliou-se o efeito da redução do cálcio livre no meio de congelamento, usando-se o quelante de cálcio etilenodiaminotetracético (EDTA) a 0,3% e 0,5%. Três cães machos sem raça definida foram submetidos à coleta de sêmen por manipulação digital (n=16). Cada ejaculado foi diluído em diluidor controle com TRIS-glicose - gema de ovo (TGE, controle), ou em diluidor TGE enriquecido com 0,3% (EDTA 0,3) ou 0,5% de EDTA (EDTA 0,5). A concentração de cálcio reduziu no meio EDTA 0,3, e todos os íons de cálcio foram quelados no meio EDTA 0,5. A adição do EDTA e a consequente quelação do cálcio não afetaram a morfologia espermática ou a integridade da membrana plasmática, no entanto, ao remover todo o cálcio do meio (EDTA 0,5), a motilidade espermática se reduziu (64,7% no TGE e 45% no EDTA 0,5; P<0,05). A integridade do acrossoma e a capacidade de ligação do espermatozoide não melhoraram com a quelação do cálcio. Apesar da influência da concentração de cálcio sobre a motilidade espermática após o descongelamento, a falha em prever a reação acrossomal prematura pode explicar por que a longevidade espermática não foi afetada pela remoção do cálcio no meio. Dessa forma, a remoção parcial ou total do cálcio, por meio da adição de EDTA, não é capaz de prevenir o dano no acrossoma ou a reação acrossomal prematura e, portanto, não aumenta a capacidade do espermatozoide de se ligar ao oócito.

ABSTRACT We evaluated the effect of reducing free calcium in the cryopreservation medium, using the calcium chelator ethylene diamine tetracetic acid (EDTA) at 0.3% and 0.5% concentrations. Three male mixed breed dogs were subjected to semen collection by digital manipulation (n=16). Each ejaculate was divided in three aliquots, and each one was diluted in TRIS-glucose-egg yolk extender with 6% glycerol and 0.5% Equex STM Paste® (TGE, control); and added with 0.3% EDTA (EDTA 0.3) or 0.5% EDTA (EDTA 0.5). Calcium concentration reduced in EDTA 0.3 and all the calcium ions were chelated in EDTA 0.5. The EDTA addition did not affect sperm morphology or plasma membrane integrity; however, by removing all free calcium (EDTA 0.5), the sperm motility reduced (64.7% in TGE and 45% in EDTA 0.5; p<0.05). Acrosome integrity and sperm binding ability were not improved by calcium chelation. The failure to prevent the premature AR may explain why sperm longevity was not affected by calcium removal. Thus, the partial or complete calcium removal, through EDTA addition, is not able to prevent acrosomal damage or premature acrosomal reaction, and therefore does not improve the dog sperm binding ability.

RESUMO Objetivou-se, por meio do presente estudo, avaliar o método de colheita farmacológica de sêmen com sondagem uretral, em machos de onças-pardas (Puma concolor) mantidos em cativeiro. A técnica proposta (Cat; N=3) foi comparada com a eletroejaculação (EE; N=4). Para a colheita farmacológica, utilizou-se medetomidina para induzir a liberação de sêmen na uretra e sonda uretral para gatos, sem janela lateral, para colheita do sêmen por capilaridade. O método foi eficaz em todos os animais usados. Por meio dessa técnica, colheram-se amostras com menor volume (106,7±30,5aµL) e maior concentração (524,1±54,3b x 106 espermatozoides/mL) em relação à EE (450,0±0,1bµL e 205,0±141,8a x 106 espermatozoides/mL). As avaliações de vigor, motilidade e patologia espermática demonstraram que a técnica não afeta a qualidade do sêmen em relação à EE (P>0,05). Dessa forma, o método proposto consiste em uma técnica mais prática e eficiente para a colheita de sêmen com boa qualidade, dispensando o eletroejaculador.

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the pharmacological semen collection method with urethral catheterization (CT) in captive cougar (Puma concolor) males. The pharmacological method (CT; N= 3) was compared to the electroejaculation technique (EE; N= 4). For CT collection, medetomidine was administrated to induce semen release using a tomcat catheter inserted into the urethra to collect by capillarity. The proposed method was efficacious on all animals used. Through the CT method, semen collected yielded smaller volume (106,7±30,5aµL) and higher concentration (524,1±54,3b x 106sperm/mL) compared to EE (450,0±0,1bµL and 205,0±141,8a x 106 sperm /mL). Evaluations of vigor, motility and sperm pathology demonstrated that CT does not affect semen quality when compared to EE (P> 0.05). Thus, the proposed method consists of a more practical and efficient technique for semen collection with good quality, eliminating the need for eletroejaculation.

Objetivou-se com o presente estudo monitorar o comportamento do uso territorial de um macho de onça parda, capturado no Parque Estadual da Serra do Brigadeiro (PESB), por meio da telemetria, usando colar de GPS via Satélite Globalstar. O monitoramento de doze meses resultou na transmissão via satélite de 328 localizações, as quais sugerem que a área utilizada por esse felino seja de aproximadamente 610km2, sendo esta a maior área já descrita para a espécie. Foi possível observar que apenas 20% das localizações ocorreram dentro da área do PESB. O comportamento territorial observado neste trabalho mostra a vulnerabilidade do animal a ações antrópicas, como a caça, atropelamentos e o contato com patógenos entre animais silvestres e domésticos. Observou-se também que duas rodovias configuram barreiras artificiais para o deslocamento do animal, possivelmente impedindo o fluxo gênico entre o PESB e dois outros importantes parques. Com os dados levantados é possível a sugestão de ações de manejo, como a criação de uma conectividade efetiva entre o PESB, o Parque Estadual do Rio Doce e o Parque Nacional do Caparaó, o que poderia contribuir para o intercâmbio genético entre as populações e, dessa forma, favorecer a conservação não somente da onça parda.

We aimed to study the territorial behavior of a male cougar, captured in the Parque Estadual da Serra do Brigadeiro (PESB), using a GPS collar and the Globalstar Satellite. Monitoring the animal for nine months we obtained 328 locations. The data suggest that the area used by this feline is approximately 610km2, the largest area described for this specie. It was also possible to observe that only 20% of the locations of the animal occurred within the PESB area. The territorial behavior observed in this study shows the vulnerability of the animal to human activities such as hunting, road kill and contact with pathogens from domestic animals. It was also observed that two roads constitute artificial barriers for animal movement, possibly preventing gene flow between the PESB and two other parks. The creation of an effective connectivity between the PESB, the Parque Estadual do Rio Doce and the Parque Nacional do Caparaó is critical to ensure genetic exchange between the animal populations and thereby promote their conservation.

O trematodeo digenético Paratanaisia bragai é descrito como parasito dos túbulos coletores renais e ureteres de aves. Esse helminto é usualmente pouco patogênico para a maioria dos hospedeiros; porém, em altas cargas parasitárias e em animais mais suscetíveis, pode causar sérios danos que resultam em apatia, perda de peso, desidratação e até mesmo a morte. O presente trabalho objetivou relatar pela primeira vez o trematoide P. bragai parasitando os rins de um passeriforme da espécie Estrilda astrild, conhecido popularmente como bico-de-lacre, de distribuição cosmopolita. A partir da análise histopatológica dos rins da ave, observou-se a presença dos vermes adultos e de ovos, grande dilatação dos ductos coletores renais, destruição e achatamento das células epiteliais de revestimento e, ao redor dos parasitos, observou-se moderada reação inflamatória. Os autores sugerem que a infecção pode ter sido acidental, uma vez que os moluscos terrestres que servem de hospedeiros intermediários para P. bragai não fazem parte da dieta natural descrita para os bico-de-lacre. Os resultados encontrados no presente estudo confirmaram um bico-de-lacre como possível hospedeiro de P. bragai, acrescentando essa espécie de ave e possivelmente todo o grupo dos passeriformes na epidemiologia da infecção por esse trematoide.

O presente trabalho consiste no primeiro relato de criptorquidismo em uma jaguatirica, adulta, de vida livre. Para a captura foram empregadas armadilhas com desarme de guilhotina, usando como isca vísceras de bovino. O animal foi contido quimicamente por meio de dardos anestésicos e mantido sob anestesia, utilizando a associação de cloridrato de quetamina e cloridrato de xilazina. Durante o exame andrológico, observou-se que o testículo esquerdo localizava-se subcutâneo, próximo à região inguinal, caracterizando-se criptorquidismo unilateral. Esse testículo apresentava-se flácido, com volume de 2,57mL, enquanto o testículo contralateral apresentava consistência firme e volume de 11,50mL. A área ocupada pelas espículas penianas mostrou-se compatível com a de animais reprodutores. O criptorquidismo é uma condição hereditária ligada à baixa variabilidade genética, já relatada em felinos silvestres consanguíneos. Nesse sentido, devido ao crescente isolamento populacional em fragmentos florestais, este achado torna-se preocupante, uma vez que pode ser indicativo de endogamia em populações de jaguatiricas de vida livre.

This paper is the first report of unilateral cryptorchidism in an adult wildlife ocelot, captured in Parque Estadual do Rio Doce. Cage traps were used to capture the animal, using bovine offal as bait. The animal was anesthetized with anesthetic darts and kept under anesthesia through a combination of ketamine and xylazine. The andrologycal examination showed that the left testicle was located subcutaneously near the inguinal region. In this case of unilateral cryptorchidism, the testis was soft and had a volume of 2.57mL, while the contralateral testis had a firm consistency and volume of 11.50mL. The length of the region occupied by the penile spikes was similar to other breeding animals. Cryptorchidism is an inherited condition linked to low genetic variability previously reported in consanguineous wild cats. Due to the increasing isolation of wild population in forest fragments, this finding is concerning because it can be indicative of inbreeding in wild ocelot populations.

Estudou-se o espaço intertubular e descreveu-se seu arranjo em jaguatirica adulta (Leopardus pardalis). Para tal, colheram-se fragmentos dos testículos, de cinco jaguatiricas adultas, provenientes de cativeiro, obtidos por biópsia incisional. O compartimento intertubular correspondeu a 19,4% do parênquima, sendo 3,9% ocupado por células de Leydig. Estes se apresentaram uninucleados, com o núcleo arredondado e nucléolo único, e com grande quantidade de grânulos pigmentares no citoplasma. O compartimento intertubular apresentou padrão do tipo II, e o tecido conjuntivo foi o componente mais abundante do tecido intertubular. Observou-se pequeno percentual de células de Leydig na espécie estudada, e o número médio por grama de testículo, 33,39 x10(6), apresentou-se dentro da amplitude descrita para a maioria dos mamíferos.

The aim of this study was to do a quantitative investigation of the intertubular space and describe its arrangement in adult ocelots (Leopardus pardalis). In this experiment we used testicular fragments, obtained through biopsy from five adult ocelots maintained in captivity. The intertubular compartment corresponded to 19.4% of the testicular parenchyma, and 3.9% of this compartment was occupied by Leydig cells. The Leydig cells showed to be uninucleate, with rounded nuclei and single nucleoli, with a large amount of pigment granules in their cytoplasm. The intertubular compartment showed a clear pattern of type II and the conjunctive tissue was the most abundant component of the intertubular tissue. Despite the small unit volume of Leydig cells in adult ocelots, the average number per gram of testis (33.39 x106) was within the range described for most mammals.

Avaliou-se o efeito do soro de cadela em estro na maturação in vitro de ovócitos caninos, utilizando-se 92 ovócitos de cadelas, submetidas à cirurgia eletiva de ovarioisterectomia. Os ovócitos foram selecionados e distribuídos em dois tratamentos: T1 (n = 48), ovócitos cultivados in vitro durante 96 horas utilizando meio base - TCM199 + 5µg/mL de LH + 20µg/mL de FSH - mais 10% de soro inativado de vaca em estro e T2 (n = 44), ovócitos cultivados em meio base mais 10% de soro inativado de cadela em estro. O percentual de ovócitos observados em metáfase I não indicou diferenças (P>0,05) entre T1 (2,1%) e T2 (0,0%), porém a taxa de ovócitos maduros (metáfase II) foi diferente (P<0,05), sendo 27,1% em T1 e 47,7% em T2. O mesmo fato ocorreu com a taxa de cromatina condensada (P<0,01), com 14,6 e 0,0%, respectivamente. Nos ovócitos sem configuração cromossômica, não foram observadas diferenças (P>0,05), sendo 56,3% em T1 e 52,3% em T2. Estes resultados indicam que a adição de soro de cadela em estro no meio de cultivo oferece melhores condições para o desenvolvimento in vitro, quando comparado à de soro de vaca em estro.

This study aimed to evaluate the effect of estrus on in vitro canine oocyte. A total of 92 oocyte from bitches under ovary-hysterectomy surgery was used. The oocytes were selected and randomly assigned to two different treatments, being T1 (n = 48) in vitro cultured for 96h using basic medium (TCM199 + 5µg/mL of LH + 20µg/mL of FSH), plus 10% of cow inactive serum in estrus and T2 (n = 44) basic medium plus 10% of bitch inactive serum in estrus. The percentage of oocyte observed on metaphase I do not indicate a difference (P>0.05) between T1 (2.1%) and T2 (0.0%). However, the rate of mature oocyte (metaphase II) was different (P<0.05), being 27.1% for T1 and 47.7% for T2. There was difference (P<0.05) in the condensed chromatin rate for T1 (14.6 %) and T2 (0.0 %), respectively. There was no difference (P>0.05) between T1 (56.3%) and T2 (52.3%) in oocyte with no chromosome configuration. These results indicate that supplementation with estrus bitch serum on culture media offer better conditions to in vitro development, when compared to estrus cow serum.

Avaliou-se a eficácia de duas soluções de manipulação (SM) de embriões de camundongas nos estádios de blastocisto inicial (Bin), mórula compacta grau I (McI) e II (McII), distribuídos aleatoriamente em três tratamentos (T), de acordo com a solução de manutenção. No T1 usou-se PBS modificado (controle); no T2, SME e no T3, SME enriquecida. Os embriões foram mantidos durante quatro horas na solução de manutenção e posteriormente classificados quanto ao estádio de desenvolvimento e à qualidade embrionária. Logo após, foram cultivados em meio TCM 199 e classificados novamente quanto ao estádio de desenvolvimento e à qualidade embrionária. A taxa de desenvolvimento dos embriões após manutenção por quatro horas em solução de manipulação foi menor (P<0,05) nos embriões do controle, comparada à de embriões do SME e SME enriquecida, diferença esta não observada (P>0,05) após o cultivo in vitro. Os embriões McII do T3 tiveram maior desenvolvimento (P<0,05) em relação aos embriões do T1 e T2, indicando o efeito benéfico do enriquecimento da solução SME. Conclui-se que as soluções de manipulação SME e SME enriquecida influenciaram beneficamente o desenvolvimento de embriões

The effect of embryo manipulation solution followed by in vitro culture in mice embryos was studied. The embryos at early blastocyst (Bin), and compact morula grades I (McI) and II (McII) were randomly assigned into three treatments. T1 used modified PBS (control), T2 used EMS, and T3 used EMS supplemented. In each treatment, the embryos were kept in manipulation solution for four hours. Finishing the manipulation period, the embryos were classified according the development stage and quality. Following, the embryos were cultured in TCM 199. After the culture period, the embryos were evaluated according to quality and development stage. The development rate for Bin, McI, and McII after maintenance for four hours in manipulation solution was lower for control embryo (P>0.05) as compared to EMS and EMS supplemented embryos. After in vitro culture, no differences (P>0.05) on embryo development rate among control, EMS, and EMS supplemented were observed. Moreover, McII from EMS supplemented had a higher development (P<0.05) (93%) as compared to control (82.5%) and EMS (83.9%), suggesting a beneficial effect of EMS supplemented. EMS and EMS supplemented embryos had a positive effect on embryo development, showing higher embryo development than those in PBS solution

Estimaram-se as correlações entre os níveis de testosterona e o volume da glândula nasal e a morfometria das células de Leydig no parênquima testicular de capivaras sexualmente maduras. Utilizaram-se 10 capivaras com aproximadamente 28 meses de idade e com peso médio corporal de 50kg e testicular de 28g. O índice gonadossomático e o volume médio da glândula nasal foram 0,11±0,02% e 34,12±13,04ml, respectivamente, e a concentração sérica de testosterona 25,07±14,73ng/ml. A proporção volumétrica de células de Leydig e o índice leydigossomático foram 28,8± 8,3% e 0,030±0,007%, respectivamente. Os volumes total e individual de células de Leydig foram 6,88±1,92ml e 2228,14±272,59<FONT FACE=Symbol>´</FONT>10-12ml, respectivamente. O número de células de Leydig por testículo e por grama de testículo foram, respectivamente, 3079,4±719,9<FONT FACE=Symbol>´</FONT>10(6) e 115,09±31,78<FONT FACE=Symbol>´</FONT>10(6). Concluiu-se que o aumento dos níveis séricos de testosterona foi acompanhado por aumento proporcional do volume da glândula nasal de capivaras e que a concentração desse hormônio é tanto mais alta quanto maior for o volume da célula de Leydig.

The testosterone levels with nasal gland volume and Leydig cell morphometry in sexually mature capybaras were compared using 10 adult capybaras, aging 28 months. Body and testicular weight were 50kg and 28g, respectively. The gonadosomatic index was 0.11±0.02%, while nasal gland volume was 34.12±13.04ml. Serum testosterone concentration was 25.07±14.73ng/ml. Leydig cell volume density and leydigosomatic index were, respectively, 28.8±8.3% and 0.030±0.007%. Total and individual Leydig cell volumes were 6.88±1.92ml and 2,228.14±272.59x10-12ml, respectively. Leydig cell numbers per testis and per gram of testis were, respectively, 3,079.4±719.9x10(6) and 115.09±31.78x10(6) cells. These results show that increase in serum testosterone concentration is correlated to a proportional increase of nasal gland and Leydig cell volume in capybaras.

Investigou-se a angioarquitetura venosa da genitália de fêmeas bovinas não prenhes, para avaliar a presença de possíveis anastomoses dos vasos provenientes da região da vulva e da vagina com a veia útero-ovariana, usando-se cinco peças obtidas em abatedouros. No laboratório, um ramo da veia vaginal caudal, infundido com contraste radiográfico intravascular, foi submetido à radiografia. Observou-se que a veia vaginal forma intensa rede de anastomoses na superfície ventral do útero, entre os antímeros direito e esquerdo. As genitálias apresentaram anastomoses dos vasos vulvares e vaginais com vasos da cérvice, corpo e cornos uterinos, sugerindo que parte de um agente luteolítico administrado via intravulvosubmucosa pode ser transportado diretamente aos ovários por uma rota local, sem atingir a circulação sistêmica.

The venous angioarchitecture of the non-pregnant female genital organs from five cattle obtained from a slaughterhouse was studied for possible anastomoses of the vulva and vagina vasa and the uterus-ovary vein, with the aid of the X-ray technique. In the laboratory, a branch of the caudal vaginal vein was injected with radiographic contrast. Vaginal vein formed and anastomotic network in the ventral surface of the uterus between the right and left sides. The genitals present anastomoses of the vulvar and vaginal veins with vasa of cervix, body and uterine horns and suggest that a portion of luteolytic agents injected through intravulvosubmucosal route can be transported directly to the ovary through a local route before reaching the systemic circulation.

Realizaram-se estudos morfológico e funcional da espermatogênese em 15 testículos de catetos adultos, provenientes de abatedouro comercial de animais silvestres. Foram estudados os estádios do ciclo do epitélio seminífero (CES), a população celular dos túbulos seminíferos, o rendimento intrínseco da espermatogênese, o índice das células de Sertoli, o diâmetro médio dos túbulos seminíferos e a proporção volumétrica dos componentes do parênquima testicular. O coeficiente de eficiência de mitoses espermatogoniais foi de 22,54, a eficiência da mitose de 22,54, o rendimento meiótico de 1:2,7 e o rendimento geral da espermatogênese de 1:64. Concluiu-se que a espermatogênese dos catetos é muito semelhante à espermatogênese de suínos.

The aim of this study was to analyze morphologically and functionally the spermatogenesis in adult collared peccary. Fifteen testes provided by a commercial wild animal abattoir were used. The stages of the seminiferous epithelium cycle, the cellular number of the seminiferous tubules, the intrinsic efficiency of spermatogenesis, the Sertoli cells, the mean diameter of the seminiferous tubules and the volumetric proportion of testicular parenchyma components were analyzed. The mitosis efficiency coefficient in collared peccary was 22.54, the meiotic profile, 1:2.7, and spermatogenesis general profile was 1:64. It was concluded that spermatogenesis in peccary is very similar to that in pigs.